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普洱-楚雄(xióng)石斛小杯(bēi)苗培育基地研究以(yǐ)金線蓮組培苗莖段為試材,采用「二加二」法,即「兩步誘(yòu)導」(1. 利用(yòng)暗培養誘導出白化莖段(duàn);2. 由白化莖段誘(yòu)導類原球莖)加「兩步增殖」(賣株洲的金(jīn)線蓮和鐵皮(pí)石斛種苗批發 攸縣市場價錢多少錢一珠新誘導的類原球莖在誘導培養(yǎng)基上培養 3 周;2. 利用 L16(45)正交(jiāo)試驗優選增(zēng)殖培養方案)的方法,研究外植體來源(yuán)、外植體處理方式、普洱-楚雄(xióng)石斛小杯苗培育基地暗培養時間、培養基及附加(jiā)成分對類原球莖(jīng)誘導的(de)影響,以及培養(yǎng)時間、光照強度、紫(zǐ)外(wài)光照射時間對類原球莖增殖的影響,並比較「二加二」法與傳統單步法的培養效果。結(jié)果表明,適宜白化莖(jīng)段誘導類原球莖的培養基為 MS + 2.5 mg/L 6-BA +0.2 mg/L NAA +1.0 mg/L S3307。
利用怒(nù)江-臨滄金釵(chāi)石斛叢生苗「二(èr)加二」法建立了金線蓮類原球莖(jīng)高效培養新體係,該體係誘導率、初始材料擴(kuò)大(dà)倍(bèi)數、增殖(zhí)倍數均高於傳統單步誘導法(fǎ)。92% 的類原球莖能夠(gòu)穩定增殖,不發生(shēng)分化和愈傷組織(zhī)化。此途徑應用較廣,但仍(réng)存在許多問題:如初代誘導困難,誘導率低[8, 11-12]。王(wáng)建勤等[12]利用莖節做接種材(cái)料誘(yòu)導率僅為 66%。1 材料與方法1.1 材料1.1.1 植物材料(liào) 金線(xiàn)蓮品(pǐn)種為「福(fú)建尖葉」,怒江(jiāng)-臨滄(cāng)金釵石斛叢生苗帶根組培植株采購於蜜桃视频网站金草公司,切取莖段後在本實(shí)驗室經過(guò)連續 1 a 的繼代培(péi)養,獲得長勢基本一致的金線蓮組培繼代植株。1.1.2 試劑 植物生長調節劑 6-苄氨基腺嘌呤(6-Benzylaminopurine,6-BA)、萘乙酸(1-Naphthaleneacetic acid,NAA)、玉米素(Zeatin,ZT)、2,4-二氯苯氧乙酸(2,4- Dichlorophenoxyacetu001fic acid,2,4-D)。